Posted by on 7 lipca 2018

Natomiast w regionach międzypęcherzykowych u czterech innych pacjentów z makronodularnym przerostem nadnerczy niezależnym od kortykotropiny nie można było wykryć drugiego somatycznego somatu; obserwowano tylko mutacje w linii płciowej ARMC5 (ryc. S7 w dodatkowym dodatku). Rodzinne badania przesiewowe pod kątem mutacji ARMC5 przeprowadzono następnie u 11 krewnych pierwszego stopnia 7 pacjentów z indeksem. Żaden z tych krewnych nie znał zespołu Cushinga ani żadnego znanego nowotworu nadnerczy. Zmiany linii płciowej ARMC5 linii płciowej wykryto u 6 spośród 11 krewnych, którzy byli młodszym rodzeństwem lub dziećmi pacjentów z indeksem. Kolejne badanie CT wykazało rozrost guzkowy nadnerczy z obustronnymi guzkami w zakresie od 8 mm do 2,5 cm u 5 z tych 6 krewnych. Nieprawidłowe reakcje na deksametazon obserwowano u 3 z 6 krewnych, a zwiększone 24-godzinne wydalanie kortyzolu w moczu wykryto w 1. Nie stwierdzono żadnych nieprawidłowości w wydzielaniu kory nadnerczy ani w badaniach TK u żadnego z 5 krewnych z niezmutowanymi allelami ARMC5.
Analiza transkryptomu
Funkcja ARMC5 nie jest znana. Aby ocenić funkcjonalne konsekwencje inaktywacji ARMC5, przeanalizowaliśmy transkryptom 10 próbek nowotworu uzyskanych od pacjentów z niekontrolowanym kortykotropiną makronodularnym przerostem nadnerczy (5 z mutacjami ARMC5 i 5 z niezmutowanym ARMC5). Sortowanie tych guzów bez świadomości ich statusu mutacji (nienadzorowane hierarchiczne grupowanie) dało dwie odrębne grupy: jedną zawierającą 5 zmutowanych guzów, a drugą zawierającą 5 niezmutowanych guzów (P = 0,008 według dokładnego testu Fishera) (ryc. S8 w Dodatek dodatkowy). Kilkaset genów ulega różnej ekspresji między dwiema grupami. Transkryptom zmutowanych nowotworów został znacznie wzbogacony w geny związane z przetwarzaniem RNA (tabele S10 i S11 w dodatkowym dodatku). To wyraźnie wskazuje, że mutacje ARMC5 mają duży wpływ na ekspresję genów i identyfikują podgrupę pacjentów z niezależnym od kortykotropiny makronodularnym przerostem kory nadnerczy.
Analiza immunohistochemiczna i hodowla komórkowa i transfekcja
Analiza immunohistochemiczna próbek nadnerczy i dwóch linii komórkowych (H295R i HeLa) wykazała, że ARMC5 znajduje się głównie w cytoplazmie (ryc. S9 w dodatku uzupełniającym). U pacjentów z makronodularnym przerostem kory nadnerczy niezależnym od kortykotropiny i mutacją nonsensowną ARMC5 zaobserwowano obniżony poziom ARMC5 i immunoznaczenie steroidogenne enzymu CYP11A1, wyniki, które są zgodne ze zmniejszoną ekspresją enzymów steroidogennych w transkryptomie (Tabela S11 w Suplemencie Dodatkowym) .
Rysunek 4. Rysunek 4. Analiza roli ARMC5. Panele A i B pokazują wpływ inaktywacji ARMC5 przez siRNA na ekspresję ARMC5, NR5A1, NR0B1, MC2R, CYP17A1 i CYP21A2 oraz na stymulację podstawową i stymulowaną forskoliną syntezą kortyzolu w adrenokortowych komórkach H295R.
[przypisy: bielenda olejek do kąpieli, Upadłość transgraniczna, przeszczep chondrocytów ]

Powiązane tematy z artykułem: bielenda olejek do kąpieli przeszczep chondrocytów Upadłość transgraniczna

Posted by on 7 lipca 2018

Natomiast w regionach międzypęcherzykowych u czterech innych pacjentów z makronodularnym przerostem nadnerczy niezależnym od kortykotropiny nie można było wykryć drugiego somatycznego somatu; obserwowano tylko mutacje w linii płciowej ARMC5 (ryc. S7 w dodatkowym dodatku). Rodzinne badania przesiewowe pod kątem mutacji ARMC5 przeprowadzono następnie u 11 krewnych pierwszego stopnia 7 pacjentów z indeksem. Żaden z tych krewnych nie znał zespołu Cushinga ani żadnego znanego nowotworu nadnerczy. Zmiany linii płciowej ARMC5 linii płciowej wykryto u 6 spośród 11 krewnych, którzy byli młodszym rodzeństwem lub dziećmi pacjentów z indeksem. Kolejne badanie CT wykazało rozrost guzkowy nadnerczy z obustronnymi guzkami w zakresie od 8 mm do 2,5 cm u 5 z tych 6 krewnych. Nieprawidłowe reakcje na deksametazon obserwowano u 3 z 6 krewnych, a zwiększone 24-godzinne wydalanie kortyzolu w moczu wykryto w 1. Nie stwierdzono żadnych nieprawidłowości w wydzielaniu kory nadnerczy ani w badaniach TK u żadnego z 5 krewnych z niezmutowanymi allelami ARMC5.
Analiza transkryptomu
Funkcja ARMC5 nie jest znana. Aby ocenić funkcjonalne konsekwencje inaktywacji ARMC5, przeanalizowaliśmy transkryptom 10 próbek nowotworu uzyskanych od pacjentów z niekontrolowanym kortykotropiną makronodularnym przerostem nadnerczy (5 z mutacjami ARMC5 i 5 z niezmutowanym ARMC5). Sortowanie tych guzów bez świadomości ich statusu mutacji (nienadzorowane hierarchiczne grupowanie) dało dwie odrębne grupy: jedną zawierającą 5 zmutowanych guzów, a drugą zawierającą 5 niezmutowanych guzów (P = 0,008 według dokładnego testu Fishera) (ryc. S8 w Dodatek dodatkowy). Kilkaset genów ulega różnej ekspresji między dwiema grupami. Transkryptom zmutowanych nowotworów został znacznie wzbogacony w geny związane z przetwarzaniem RNA (tabele S10 i S11 w dodatkowym dodatku). To wyraźnie wskazuje, że mutacje ARMC5 mają duży wpływ na ekspresję genów i identyfikują podgrupę pacjentów z niezależnym od kortykotropiny makronodularnym przerostem kory nadnerczy.
Analiza immunohistochemiczna i hodowla komórkowa i transfekcja
Analiza immunohistochemiczna próbek nadnerczy i dwóch linii komórkowych (H295R i HeLa) wykazała, że ARMC5 znajduje się głównie w cytoplazmie (ryc. S9 w dodatku uzupełniającym). U pacjentów z makronodularnym przerostem kory nadnerczy niezależnym od kortykotropiny i mutacją nonsensowną ARMC5 zaobserwowano obniżony poziom ARMC5 i immunoznaczenie steroidogenne enzymu CYP11A1, wyniki, które są zgodne ze zmniejszoną ekspresją enzymów steroidogennych w transkryptomie (Tabela S11 w Suplemencie Dodatkowym) .
Rysunek 4. Rysunek 4. Analiza roli ARMC5. Panele A i B pokazują wpływ inaktywacji ARMC5 przez siRNA na ekspresję ARMC5, NR5A1, NR0B1, MC2R, CYP17A1 i CYP21A2 oraz na stymulację podstawową i stymulowaną forskoliną syntezą kortyzolu w adrenokortowych komórkach H295R.
[przypisy: bielenda olejek do kąpieli, Upadłość transgraniczna, przeszczep chondrocytów ]

Powiązane tematy z artykułem: bielenda olejek do kąpieli przeszczep chondrocytów Upadłość transgraniczna