Posted by on 11 września 2018

W analizach pokazanych w panelach A i B jako kontrolę obciążenia zastosowano dehydrogenazę gliceraldehydo-3-fosforanową (GAPDH). Panel C pokazuje wyniki ilościowej analizy migracji podocytów. Wartości P obliczono za pomocą testu wielokrotnego porównania Bonferroniego; patrz Dodatek Uzupełniający w celu uzyskania szczegółowych informacji. Paski T wskazują odchylenia standardowe. Dodatek lipopolisacharydu do pożywki hodowlanej indukował ekspresję białka B7-1 w podocytach (Figura 1A). Konstytutywna ekspresja białka B7-1 została znaleziona w podocytach .3 – / – .3 z integryną .3 (rysunek 1B). Abatacept blokował migrację podocytów wywołaną lipopolisacharydem lub indukowaną B7-1 (ryc. S3A w dodatku uzupełniającym). Wyciszanie genu B7-1 lub ekspresja skróconego konstruktu (B7-1 ) również tłumiły migrację podocytów (ryc. S3A i S3B w dodatkowym dodatku). Leczenie abataceptem lub wyciszanie genu B7-1 odwróciło ruchliwość podocytów .3 – / – do poziomu podstawowego (ryc. S3C w dodatku uzupełniającym). Figura 1C pokazuje ilościowo określone działanie abataceptu na migrację podocytów.
Analiza biochemiczna wiązania B7-1 z integryną .1
Ponieważ abatacept hamował migrację podocytów .3 – / -, postawiliśmy hipotezę, że B7-1 moduluje funkcję integryny. Endogenne badania koimmunoprecypitacji wykazały, że .1 oddziałuje z integrynami .5 i .V w podocytach prawidłowych i .3 – / – (ryc. S4A w dodatkowym dodatku), co sugeruje, że .5 i .V są partnerami .1 łańcucha . przy braku .3. Zaobserwowaliśmy kolokalizację B7-1 z winkuliną w kontaktach ogniskowych (zrosty komórkowe, które zawierają integryny) podocytów .3 – / – (ryc. S4B w dodatkowym dodatku) i zaobserwowano specyficzne oddziaływanie pomiędzy endogenną integryną B7-1 i .1 w .3 – / – podocyty (ryc. S4C w dodatkowym dodatku). Badania mapowania i rozwijania domen za pomocą rekombinowanych oczyszczonych białek (ryc. S4D, S4E i S4F w dodatkowym dodatku) ujawniły bezpośrednią interakcję między cytoplazmatycznymi ogonami B7-1 i .1, co sugeruje, że ta interakcja ma kluczowe znaczenie dla efektu B7-1 na funkcję integryny .1. Aby sprawdzić, czy obserwowane oddziaływanie było specyficzne dla B7-1 i .1, przeprowadziliśmy serię badań koimmunoprecypitacji transfekowanych komórek HEK293. Wiązanie talinu, o którym wiadomo, że oddziałuje z integryn ., integryną 7 do .1 lub .3 służyło jako kontrola pozytywna. Oprócz .1, B7-1 oddziałuje również z integryną .3 (ryc. S5A w dodatkowym dodatku) poprzez bezpośrednie wiązanie między dwoma białkami (ryc. S5B w dodatku uzupełniającym). Przeciwnie, B7-2 (CD86) 9, które nie ulega ekspresji w podocytach 4, nie oddziaływuje z integryną .1 lub .3 (ryc.
[przypisy: klinika okulistyczna wroclaw, osteopata poznań, próba valsalvy ]

Powiązane tematy z artykułem: klinika okulistyczna wroclaw osteopata poznań próba valsalvy

Posted by on 11 września 2018

W analizach pokazanych w panelach A i B jako kontrolę obciążenia zastosowano dehydrogenazę gliceraldehydo-3-fosforanową (GAPDH). Panel C pokazuje wyniki ilościowej analizy migracji podocytów. Wartości P obliczono za pomocą testu wielokrotnego porównania Bonferroniego; patrz Dodatek Uzupełniający w celu uzyskania szczegółowych informacji. Paski T wskazują odchylenia standardowe. Dodatek lipopolisacharydu do pożywki hodowlanej indukował ekspresję białka B7-1 w podocytach (Figura 1A). Konstytutywna ekspresja białka B7-1 została znaleziona w podocytach .3 – / – .3 z integryną .3 (rysunek 1B). Abatacept blokował migrację podocytów wywołaną lipopolisacharydem lub indukowaną B7-1 (ryc. S3A w dodatku uzupełniającym). Wyciszanie genu B7-1 lub ekspresja skróconego konstruktu (B7-1 ) również tłumiły migrację podocytów (ryc. S3A i S3B w dodatkowym dodatku). Leczenie abataceptem lub wyciszanie genu B7-1 odwróciło ruchliwość podocytów .3 – / – do poziomu podstawowego (ryc. S3C w dodatku uzupełniającym). Figura 1C pokazuje ilościowo określone działanie abataceptu na migrację podocytów.
Analiza biochemiczna wiązania B7-1 z integryną .1
Ponieważ abatacept hamował migrację podocytów .3 – / -, postawiliśmy hipotezę, że B7-1 moduluje funkcję integryny. Endogenne badania koimmunoprecypitacji wykazały, że .1 oddziałuje z integrynami .5 i .V w podocytach prawidłowych i .3 – / – (ryc. S4A w dodatkowym dodatku), co sugeruje, że .5 i .V są partnerami .1 łańcucha . przy braku .3. Zaobserwowaliśmy kolokalizację B7-1 z winkuliną w kontaktach ogniskowych (zrosty komórkowe, które zawierają integryny) podocytów .3 – / – (ryc. S4B w dodatkowym dodatku) i zaobserwowano specyficzne oddziaływanie pomiędzy endogenną integryną B7-1 i .1 w .3 – / – podocyty (ryc. S4C w dodatkowym dodatku). Badania mapowania i rozwijania domen za pomocą rekombinowanych oczyszczonych białek (ryc. S4D, S4E i S4F w dodatkowym dodatku) ujawniły bezpośrednią interakcję między cytoplazmatycznymi ogonami B7-1 i .1, co sugeruje, że ta interakcja ma kluczowe znaczenie dla efektu B7-1 na funkcję integryny .1. Aby sprawdzić, czy obserwowane oddziaływanie było specyficzne dla B7-1 i .1, przeprowadziliśmy serię badań koimmunoprecypitacji transfekowanych komórek HEK293. Wiązanie talinu, o którym wiadomo, że oddziałuje z integryn ., integryną 7 do .1 lub .3 służyło jako kontrola pozytywna. Oprócz .1, B7-1 oddziałuje również z integryną .3 (ryc. S5A w dodatkowym dodatku) poprzez bezpośrednie wiązanie między dwoma białkami (ryc. S5B w dodatku uzupełniającym). Przeciwnie, B7-2 (CD86) 9, które nie ulega ekspresji w podocytach 4, nie oddziaływuje z integryną .1 lub .3 (ryc.
[przypisy: klinika okulistyczna wroclaw, osteopata poznań, próba valsalvy ]

Powiązane tematy z artykułem: klinika okulistyczna wroclaw osteopata poznań próba valsalvy